RND試劑盒的制備工藝以雙抗體夾心ELISA法為核心,結合精密生物活性物質處理技術。以下為關鍵工藝流程解析:
1.抗體篩選與包被
選用針對RND1蛋白的特異性單克隆抗體,通過預實驗驗證其與目標抗原的高親和力(交叉反應率<0.5%)。
采用物理吸附法將抗體固定于微孔板表面,形成均勻致密的捕獲層,確保后續抗原結合效率。
2.酶標檢測體系構建
辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體經梯度稀釋優化,實現信號放大與背景噪聲控制的平衡。
配套開發TMB顯色系統,建立劑量-響應標準曲線(相關系數r≥0.9900),保障定量檢測精度。
二、RND試劑盒標準化組裝流程
1.模塊化封裝工藝
按48T/96T規格分裝微孔板、標準品(濃度梯度0–10 ng/mL)、洗滌液(Tris緩沖鹽體系)等組件。
引入惰性氣體保護封膜技術,延長試劑盒穩定性至6個月(2–8℃保存)。
2.質控驗證程序
批內精密度測試:同一批次產品重復測定RND1標準品(高/中/低濃度),變異系數CV<10%。
回收率實驗:添加已知量抗原至血清樣本,回收率范圍85%–115%,證實基質效應可控。
總之,該工藝體系通過抗原-抗體分子識別與信號轉化技術的協同創新,實現了復雜生物樣本中RND1分子的高靈敏檢測。
